Sledujeme vliv extracelulárních vezikulů reprodukčního traktu na zrání gamet a časný vývoj embryí.
Kontaktní osoba: Kateřina Komrsková
Extracelulární vezikuly v reprodukci
Schéma znázorňuje obousměrnou komunikaci mezi pohlavními buňkami a extracelulárními vezikulami uvolňovanými oviduktálním epitelem nebo raným embryem v lumen oviduktu.
Extracelulární vezikuly (EV) jsou malé membránové struktury, které zprostředkovávají vzájemnou komunikaci mezi buňkami přenosem proteinů, lipidů a nukleových kyselin. V reprodukčním traktu hrají EV zásadní roli v regulaci fyziologických procesů gamet a raných embryí. Jejich funkce však není dosud plně objasněna, zejména pokud jde o působení v různých částech samčího a samičího reprodukčního systému. Dosavadní poznatky naznačují, že EV mohou významně ovlivňovat maturaci pohlavních buněk, proces oplození i raný embryonální vývoj. Potenciál EV pro zlepšení protokolů in vitro maturace gamet, fertilizace a kultivace embryí do stadia blastocysty je přitom stále nedostatečně prozkoumán.
V našem výzkumu se zaměříme na detailní charakterizaci EV reprodukčního traktu a embryí a na jejich funkční působení. Cílem bude definovat roli EV ze samčího i samičího reprodukčního traktu se zaměřením na maturaci gamet, oplození a raný embryonální vývoj savců. Součástí projektu bude také analýza EV uvolňovaných během kultivace embryí, které mohou sloužit jako neinvazivní ukazatelé jejich kvality. Zvláštní pozornost budeme věnovat inovativní metodě ex vivo produkce EV pomocí bioreaktoru z primárních epiteliálních buněk samičím reprodukčního traktu a jejich detailní charakterizace v závislosti na hormonálním cyklu. Takto získané poznatky umožní testovat EV jako regulátory a potenciální standardizované nástroje pro úpravu kultivačních médií s cílem zvýšit kvalitu a životaschopnost embryí produkovaných in vitro.
Pro experimentální práci využijeme biologický materiál prasečího, bovinního a myšího původu, z něhož budou izolovány EV pomocí metod přizpůsobených jednotlivým modelům, včetně EV získaných ex vivo. Charakterizace proběhne zejména mikroskopickými a proteomickými přístupy. Funkční účinky EV budou hodnoceny na gametách a při vývoji embryí in vitro se zaměřením na blokaci polyspermie a embryogenezi do stadia blastocysty.
